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魯米諾發(fā)光體系在不同分析中的應(yīng)用前景

 
 
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武漢德晟生化科技有限公司

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魯米諾由于具有量子產(chǎn)率高、易合成、水溶性好等優(yōu)點(diǎn),已成為應(yīng)用zui廣泛的化學(xué)發(fā)光試劑之一。它的發(fā)展歷程就和人的艱苦歷程一樣,由開始的認(rèn)識不多,到現(xiàn)在的發(fā)光發(fā)熱,只能用一句話總結(jié):是金子總會發(fā)光。往后可能會有更多我們不知道的用途來造福我們的生活。我們只要更多的了解它才能早日發(fā)掘它的無限潛力。

在無機(jī)物分析中的應(yīng)用

利用無機(jī)離子能增強(qiáng)或抑制魯米諾體系的化學(xué)發(fā)光,可對這些金屬離子進(jìn)行測定,值得指出的是,某些金屬離子與配位劑結(jié)合后,具有比金屬離子更高的催化活性。如利用魯米諾-H2O2-鄰菲啰啉銀體系,測定銀離子的檢出限達(dá)到2.7×10-g/L3

使用增敏劑可提高檢測的靈敏度。三苯甲烷類衍生物對魯米諾發(fā)光體系的增敏作用,發(fā)現(xiàn)考馬斯亮藍(lán)G250luminol-H2O2-Cu2+體系有好的增敏效果,并采用反相流動注射技術(shù),建立了測定Cu2+的新方法,檢出限為1.5μg/mL。利用表面活性劑的局部濃集效應(yīng)實(shí)現(xiàn)膠束增敏,在發(fā)光分析中的應(yīng)用日益增多。如利用反相膠束體系FIA法測V4+,檢出限為0.05ng/mL;采用魯米諾-釩鉬雜多酸體系測水樣中的磷,使用表面活性劑增敏,可使檢出限降低5倍,達(dá)到0.02μg/L

在有機(jī)物分析中的應(yīng)用

利用有機(jī)物對魯米諾發(fā)光體系的促進(jìn)、抑制作用,可實(shí)現(xiàn)對有機(jī)物的分析測定。使用N-溴代丁二酰亞胺(NBS)、N-氯代丁二酰亞胺(NCS)為氧化劑,采用FIA技術(shù)不僅測定了自來水和井水中的NBSNCS,還基于陽離子表面活性劑抑制魯米諾-NBSNCS)化學(xué)發(fā)光的性質(zhì),建立了測定陽離子表面活性劑的新方法。

一般抗氧化劑會抑制魯米諾的化學(xué)發(fā)光。采用FIA技術(shù),考察了不同抗氧化劑對魯米諾-活性氧(超氧陰離子O2-、羥基自由基OH-、過氧亞硝酸鹽、H2O2CIO-)發(fā)光反應(yīng)的抑制作用。基于抗氧化劑對luminol-H2O2體系的抑制,結(jié)合HPEC技術(shù),測定了植物萃取液中的自由基清除劑,該方法的改進(jìn)使靈敏度提高了4倍。潛在的抗氧化劑半胱氨酸對luminol-H2O2-Co2+體系具有促進(jìn)作用,而谷胱甘肽具有抑制作用,但是對魯米諾-過亞硝酸鹽體系,二者均有增敏作用,基于這些性質(zhì)建立了測定半胱氨酸和谷胱甘肽的新方法。

在免疫分析中的應(yīng)用

化學(xué)發(fā)光分析的另一個主要用途是免疫分析。將發(fā)光試劑或增敏劑分子標(biāo)記到抗原或抗體上,進(jìn)行酶、抗原或抗體測定的化學(xué)發(fā)光免疫分析法,具有安全無污染、標(biāo)記物穩(wěn)定、快速、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。

具有較高發(fā)光效率的自由態(tài)魯米諾常被用于酶標(biāo)記的免疫分析中,利用酶標(biāo)記增敏魯米諾的發(fā)光反應(yīng)已用于血管內(nèi)皮生長因子、睪丸甾酮等測定。將半抗原用二茂鐵標(biāo)記后,利用其對luminol-H2O2-二茂鐵電致化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的抑制作用,測定了半抗原等小分子,將HRP標(biāo)記到與脂質(zhì)體結(jié)合的抗體上,發(fā)現(xiàn)其催化魯米諾發(fā)光的活性比HRP直接標(biāo)記到抗體上高125倍。

魯米諾化學(xué)發(fā)光分析在各個領(lǐng)域都得到了廣泛應(yīng)用,新的方法、新的技術(shù)不斷涌現(xiàn),特別是與FIAHPLC等技術(shù)的聯(lián)咒,克服了發(fā)光分析選擇性差的缺點(diǎn),使分析更加靈徽、準(zhǔn)確。因魯米諸性能穩(wěn)定、價(jià)格低廉,實(shí)際應(yīng)用研究分析將會有更為廣闊的應(yīng)用前景。

 

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