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溫度對TRIS-HCL緩沖液的PH值有影響嗎?

 
 
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更新 2021-06-18 16:13
 

武漢德晟生化科技有限公司

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TRIS-HCL緩沖液很穩定,可被廣泛用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備,它的生理體液的相容性好,與鈣,鎂離子不會形成沉淀,相反,磷酸鹽與鈣、鎂離子會產生沉淀。而且相同pH、相同濃度的TRIS-HCL緩沖液的離子強度比磷酸鹽緩沖液的離子強度低。這對酶類測定尤為重要。因為大離子強度易致有些酶失活。因此,有時用TRIS-HCL代替磷酸鹽緩沖液,效果更好。

TRIS-HCL緩沖液的pH受溫度影響大。一旦溫度改變,PH將發生明顯變化。而致酶活性改變,這一問題尚未引起臨床檢驗界足夠的注意。為此,我們對TRIS-HCL緩沖液的溫度系數進行測定并對實用價值作初步討論。下面實驗中用到的Tris試劑為德生科技公司所研發生產。

實驗過程:將TRIS-HCL緩沖液放人37℃水浴箱中水浴30min。蒸餾水,定標液仍置于室溫中。將溫度旋鈕置于37℃,取出平衡溫度后的緩沖液。以室溫下的蒸餾水調零,室溫下的混合磷酸鹽定標(37℃時pH684),立即測定TRIS-HCL緩沖液的pH。緩沖液置室溫中待溫度降至23℃時。以室溫的蒸餾水調零。室溫的混合磷酸鹽定標(23℃時pH686),再立即測定其相應的pH。溶液繼續置室溫中。待溫度降至室溫對。再調溫度旋鈕。定標并測定室溫時的pH

實驗結果:按照以上方法測得37℃的pH23℃的pH平均低018。比l2℃時的pH平均低032,溫度變化對緩沖液pH值的影響很大,所以一定要在使用溫度下進行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。

可見,TRIS-HCL緩沖液的pH受溫度變化影響較大,用不同方法測定時,變化值不同,兩種溫度 (37℃,23) pH 值變化,跟測定方法沒有太大關系,故我們推測,若要測定溶液在某溫度下的pH值。必須不僅將酸度計的溫度補償值也要將所有各種溶液及蒸餾水一并調節到測定溫度。

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