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詳細(xì)解讀Tris的緩沖范圍與應(yīng)用

 
 
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Tris全名三氫甲基氨基甲烷,屬于生物緩沖劑中的一種。外觀為白色結(jié)晶狀粉末,水溶性好,可溶于乙醇、乙酸、乙酯,但不溶于乙mi與四氯化碳。Tris可配置成溶液,Tris緩沖液是一類可以抵制外界少量強酸和強堿的影響,維持體系Ph值不變的溶液。Tris緩沖液在生物化學(xué)的研究工作中有著非常重要的意義。

Tris的緩沖范圍:

Tris為弱堿,在室溫25℃下時,其pKa值為8.1。根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.09.2之間,0.1mol/l的水溶液pH10.4,一般加入***用以調(diào)節(jié)pH值,就可獲得所需pH值的緩沖液。但同時需要注意溫度對于其pKa的影響并影響Tris緩沖液,溫度每降低1℃,pH增加約0.03個單位,濃度每稀釋10倍,pH降低0.03-0.05個單位。并且Tris緩沖液非常容易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液需要密封。此外Tris緩沖液對某些pH電極會產(chǎn)生一定的干擾作用,因此在使用時需要用到與Tris緩沖液具有兼容性的電極。

Tris在緩沖液中的應(yīng)用:

1M Tris-HCL6.81.5M Tris-HCL8.85xTris-甘氨酸電泳緩沖液都是SDS-PAGE最常用的試劑。

Tris***緩沖液中加入EDTA制成TE緩沖液,TE緩沖液被用于DNA的穩(wěn)定和儲存。將調(diào)節(jié)pH值的***換為乙酸既可以得到TAE緩沖液,換成硼酸則獲得TBE緩沖液,而TAETBE緩沖液都常用于核酸電泳實驗中。

Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長。

Tris緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。

由此,Tris緩沖液是核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,廣泛用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中緩沖液的制備。

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